请教GelRed预染上样缓冲液的方法
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问:新买了GelRed,比较贵,打算用节约的方法来使用,也就是把GelRed预混在上样缓冲液里,和样品混合后上样电泳。因此想请教一下有经验的站友:
1 假定使用6X上样缓冲液,应该以多大比例混合GelRed? 2 预混GelRed的上样缓冲液与核酸样品混合后,需要孵育一段时间还是可以直接上样? 3 预混在上样缓冲液中的GelRed是否稳定,是否可以长期存放,以及存放条件是室温,4度还是-20? 4 GelRed效果有比EB好吗? 多谢! 答:1.GelRed 买来一般都是10000X的,根据你要配制上样缓冲液的量来调整加入gelRed 的量,既稀释到6X。(一般LoadingBuffer就用溴酚蓝加GelRed就行了) 2.一般采用涡旋混匀,混匀充分后就可以使用。 3.GelRed 很稳定的,不过一般使用后4度保存 4.GelRed 比EB效果略次一点,不过理论上比EB安全很多,但是,GelRed会在很大程度上影响连接与转化效果。 GelRed 如果加在loading buffer里会影响条带迁移率 也就是说电泳图的条带大小是错的我们实验室用GelRed都是后染的,跑完胶再用1XGelRed泡 产品购买链接: http://www.biobars.cn/shop/goods.php?id=1628(责任编辑:大汉昆仑王) |