细胞生长检测7:碱性磷酸酶检测法(AKP法)
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碱性磷酸酶检测法( AKP 法)
1. 按 MTT 法用细胞因子处理靶细胞适当时间,用 PBS 洗去死亡细胞,洗两次。
2. 向 96 孔细胞培养板各孔中加 0.2ml 新鲜配制的底物液( 0.2mol/L 硼酸, 1mmol/L MgCl2 , 1.2mmol/L 甲伞基磷酸)。在 37 ℃ 5 % CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 3 小时。
3. 在荧光计数仪上测定荧光的量。根据测定已知不同数目细胞的荧光量作出标准曲线,根据标准曲线可得到各孔中的活细胞数。