免疫球蛋白提取技术：IgE的分离与提纯

互联网2013-09-06

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（一）材料与试剂

1．血清
2．饱和硫酸铵溶液
3．洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液
0.025 Mol/L pH7.4PB液
0.01Mol/L pH7.4PBS 液(0.14mol/L NaCl)
4．DE52
5．SephadexG150

（二）操作方法

1．取血清倍比稀释后，加等量饱和（NH4）2SO4溶液，盐析。
2．离心取沉淀，溶于少量生理盐水中，透析、除盐。
3．过DE52柱，以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱，收集洗脱蛋白峰(IgG)，弃去。
4．换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱，洗下的蛋白峰主要是IgE。
5．透析除盐。
6．过G150柱，以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱，收集洗脱液即为纯化的IgE。
7．浓缩、鉴定。

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