免疫球蛋白提取技术：IgA的分离与提纯

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（一）材料与试剂配制

1．DEAE52纤维素
2．0.10Mol/L ZnSO4液
ZnSO4·7H2O 2.88g
加水至1 000.00ml
3．饱和硫酸铵溶液
4．10％EDTA —Na
5．SephadexG200
6．0.01Mol/L pH7.4PB液
7．0.10Mol/L pH6.4PB液
8．血清

（二）操作方法

1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。
2．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。
3．10 000r/min离心10min，去上清。
4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。
5．生理盐水中透析除盐。
6．过DE52柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱蛋白（IgG）弃去。
7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收集蛋白峰，即为IgA。
8．再过SephadexG200柱，洗液为0.01Mol/L pH7.4PBS （0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD280值，取第一峰即为纯化IgA。
9．透析、浓缩、鉴定。