免疫球蛋白提取技术：分泌型IgA的分离与鉴定

（一）材料与 试剂

1．初乳
2．SephadexG200
3．0.10Mol/L pH6.8PB液
4．0.01Mol/L pH7.4PB液
5．DEAE ₅₂

（二）操作方法

1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。
2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，第一峰为IgA（含IgG）。
3． 收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
4． 将透析液浓缩至5mg/ml以上。
5． 过DE ₅₂ 层析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱，洗下蛋白峰为IgG，弃去。
6． 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脱，
收集洗脱液 ，即为较纯的IgA液。
7． 必要时，可再过一次SephadexG200柱。
8． 浓缩，鉴定