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RNase真的很顽固吗?

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刚涉及RNA抽提的新手都会听到别人说RNase很顽固,用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制tris缓冲液时就遇到了两难的境地。tris缓冲液不能用DEPC处理,只能用DEPC处理过的水配制,那么在药品称量、调pH值等过程中tris缓冲液会造到RNase的再次污染,所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是RNase并不顽固,高压灭菌可以去除其大量活性。
下面的实验照片(照片来自ambion)很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单,将不同含量的RNase用高压灭菌处理,然后与未高压灭菌处理的RNase一起来降解RNA(37度1小时),结果表明,当RNase的污染量小于100ng/ml时,高压灭菌可以去除其活性。这张照片还说明了一个问题,当你的RNA溶液中含有很微量的RNase污染时,不用过于担心,因为RNase对RNA的降解是需要时间的,更何况你的RNA是存放在低温下的。
讲得不好,请大家拍砖,但不要打脸哦,^_^

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