这些抗凝原理你真的了解吗？

通常长用的抗凝管中的抗凝剂有：

1.乙二胺四乙酸(EDTA)盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

2.肝素

3.枸橼酸钠

4.草酸钠

肝素广泛在肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖，是分散物质，平均分子量为15000(2000-40000)。肝素可加强抗凝血酶III(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶，从而具有阻止凝血酶形成，对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5IU 。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态，但由于其常可引起白细胞聚集在染色时产生蓝色背景，因此肝素抗凝血不适全血液学一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。

抗凝机制：

肝素是血液化学成分测定中最好的抗凝剂。肝素是一种含硫酸基团的黏多糖，分子量为1.5万，其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起，在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成;还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。

肝素的盐类有钠、锂、铵盐。通常用肝素抗凝的剂量是10.0~12.5IU/mL血液。临床常用肝素锂，虽其价格较贵，但抗凝效果较好。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血浆中有明显的区别。在凝血过程中由于红细胞的溶解破坏使血清钾的含量比血浆为高，由于血浆中含有Fg，其含量比血清高。因此，测定钾离子时，注意血清与血浆之间的差异。

另外肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适于白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血学检验。通过试验表明，采血时加入肝素钠抗凝剂后，对测定血液中总蛋白质含量结果有较明显的影响。但加入了抗凝剂后，阻断了凝血活酶的生成，阻止了血液凝固，导致纤维蛋白原不能水解转化成纤维蛋白单体，有效阻止了纤维蛋白单体的形成，这些纤维蛋白原仍留在血浆中。而血清是血液经凝固后，纤维蛋白原水解转化为纤维蛋白单体，并因凝固而消耗，离心后随血细胞一并分离出去了。

乙二胺四乙酸(EDTA)盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液凝固。EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。

抗凝机制：

EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一，其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的盐类有钾、钠、锂盐、均溶于水，钾盐较钠盐的溶解度大，全血胞计数最好使用EDTA的钾盐。

EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适于制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。EDTA还会影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，也不适于做止血学检验和血小板功能检验。

用EDTA抗凝血制备的涂片对粒细胞形态有影响，其影响程度与抗凝血放置时间和抗凝剂浓度有关。按照ICSH建议EDTA的使用浓度为1.4~1.6g/L血液，迅速制备涂片，粒细胞形态特征有微小的改变，有时细胞核分叶不见，细胞肿胀。如果用放置时间较长的血液制备的涂片可出现细胞浆内颗粒消失，胞浆和细胞核有空泡，染色质模糊不清。用大于1.5g/L血液浓度制备的血涂片，粒细胞可完全变性，对淋巴细胞和单核细胞也有影响，尤其是血小板，可出现肿胀、破裂而产生碎片，影响其计数，造成结果偏高。

3.枸橼酸钠：

枸橼酸钠(trisodium citrate)枸橼酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有2Na3C6H5O7。和2Na3C6H5。11H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l浓度)，与血液按1:9或1:4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。因毒性小，是输积压保养中的成分之一。

抗凝机制：

枸橼酸盐主要用于止血学检验及血沉的测定。因其毒性小，也用于输血保养液中。其抗凝机制是枸椽酸盐与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固，其反应式为Na3C6H5O7+Ca2+→CaC6H5+3Na+。

枸缘酸钠与血液按1:9使用。对于用于监测口服华法令等抗凝剂治疗的患者，测定PT、APTT所用的枸缘酸钠浓度不应随意改变，因为可能影响到国际标准化比值(INR)。

草酸盐是通过其草酸根与血液中的Ca离子形成草酸钙沉淀，使其无凝血功能。

草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。在试管内加饱和草酸钾溶液2滴(或10%溶液0.2ml)，轻轻敲击试管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤干(烘烤温度过高，可使草酸钾分解为碳酸钾而失效)，每管能使3~5ml血液不凝。供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。