凋亡细胞DNA片断提取

细胞DNA的提取：

（1）消化细胞后以1500r/min离心，去上清后重悬于冰冷的1×TBS中，再次离心加入0.5ml提取缓冲溶液（RNA酶临时加入），移入EP管中。

（2）37℃孵育1h，加4μl蛋白酶K/ml，50℃孵育3h。

（3）加入0.5ml酚/氯仿（1：1 V/V），快速来回颠倒几次。

（4）13000r/min离心1min，小心取上层含DNA的液相。

（5）估计体积加入等体积的酚/氯仿，快速来回颠倒几次。

（6）重复第4、5步，13000r/min离心1min，小心取上层含DNA的液相。

（7）加等体积的氯仿于液相样本中，颠倒混合，13000r/min离心1min。

（8）取液相加入2倍体积冰冷的纯乙醇和1/10体积的3mol/l的乙酸钠，冰浴30min。

（9）4℃13000r/min离心10分钟，弃上清，重悬于1ml的70%乙醇中。

（10）4℃13000r/min离心10分钟，尽可能弃上清。

（11）常温干燥30min，重悬于50μl的1×TE。

（12）于260nm和280nm测定DNA含量。