质粒DNA的提取及其定性定量分析
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质粒DNA的提取及其定性定量分析
实验的常见问题、关键问题及难点:
基因组DNA的污染、RNA的去除、溶液Ⅱ和 Ⅲ的配置、振摇的力度、酚的抽提、乙醇沉淀、微量操作
可能的实验结果:
图1 |
图2 |
图3 |
同一种质粒,由于其构象不同电泳时的迁移率也会有所不同,超 螺旋构象的质粒电泳时迁移的最快。图1的电泳结果不是很好,一方面上样量太大不同构象的质粒分子没有分开;另一方面有些样品RNA去除的不好,在电泳结果 上可以看到大团的荧光;此外还要注意上样的技巧,上样后稍沉降一会,使样品均匀的分布与上样孔的底部再开始电泳,这样走出的条带会较均匀。图3的结果较 好。