关于HEK293细胞转染的问题

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293细胞 总有一种转染方法适合你

问：本人刚接触细胞转染，使用的是HEK293和Invitrogen 的lipo 2000及质粒和opti-mem，看其protocol，有几点疑问：1、种板24h后，是否需要把无抗的DMEM换成opti-mem，再进行转染?如果不换，对转染效率是否有影响?2、HEK293贴壁不是很好，中间换液过程有比较多，不知有什么好的办法吗?谢谢各位兄弟

答：首先要说一下，293细胞系是最容易转染的一类细胞，根本不需要使用LF2000, 建议你使用PEI，PEI可以直接购买粉末，然后按照一微升一个一微克的量自行配置，使用非常廉价。对于293和293T细胞转染效率可以轻易达到70%以上，并且一次转染之后不需要换液，避免了换液过程中293因为贴壁不牢而脱落。而所有基于脂质体的转染试剂 ，包括LF2000的特点就是毒性太大，中途必须换液，而且造成的死亡细胞也很多。