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PCR引物设计及相关软件使用(二)

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3258

引物编辑


Some other useful function of PP5

Enzyme


Melting temperature graph

GC% graph

Stability


(五)Oligo 6.44 使用说明

主要功能:专门的引物设计软件

Oligo 6.44 启动界面

3个弹出窗口




用Oligo 设计引物时的3个标准

Tm 值曲线以选取5‘到3’的下降形状有利于引物引发聚合反应。

Frq 曲线宜选用3‘端Frq 值相对较低的片段。

ΔG 值在5’端和中间值比较高,而在3‘端相对低


选中引物

引物分析

首先检查引物二聚体尤其是3’端二聚体形成的可能性。

二项检查是发夹结构(hairpin);与二聚体相同,发夹结构的能值越低越好。

第三项检查为GC 含量,以45-55%为宜。

第四False priming 检查

Final PCR information

Search for primer using Oligo 6.44

Online primer3 service

http://frodo.wi.mit.edu/

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