免疫荧光技术

免疫荧光技术

 

1）  直接法

1． 标本经固定后， PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

2． 加荧光素标记的抗体，湿盒内 37 ℃孵育 50 分钟。

3． PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

4． 0.1 ％伊文氏兰复染。

5． PBS 洗 3 次，蒸馏水洗 2 次，每次 3 分钟，以除去 NaCl 结晶。

6． 缓冲甘油封片，镜检。

 

 

2）  间接法

1． 标本固定后， PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

2． 滴加一抗， 37 ℃ 40 分钟或 4 ℃过夜。

3． PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

4． 滴加荧光标记二抗 37 ℃ 40 分钟。

5． PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

6． 0.1 ％伊文氏兰复染。

7． PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

8． 缓冲甘油封片，镜检。