印迹膜蛋白染色
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一、所需试剂
1. 2%丽春红S浓贮存液(3-羟基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2,7-萘二磺酸):溶于30%三氯醋酸和30%磺基水杨酸中。贮存液可在室温下稳定存放1年以上。
2. PBS。
二、操作步骤
1. 在染色之前,先配制丽春红S的应用液。即将2%的丽春红S浓贮存液用1%醋酸1:10稀释即成为应用液(注意:如果使用硝酸纤维膜,须将丽春红S应用液更换为用水1:10稀释);
2. 用丽春红S应用液将PVDF膜洗1次;
3. 加入新鲜稀释的丽春红S应用液,并在室温下搅动5~10min;
4. 将PVDF膜放入PBS中漂洗数次,每次1~2min,并更换PBS;
5. 根据需要将转印部位和分子量标准位置进行标记,至此PVDF膜可用于封闭和加入抗体。