PCR退火温度计算公式

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PCR退火温度应如何设置？

引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：

Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)

复性温度=Tm值-(5～10℃)

在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合， 提高PCR 反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。