吸附分离法（贴壁法）分离单核细胞

单核细胞具有吸附于固相表面的特性，把单个核细胞放于玻璃或塑料平皿内，37℃于孵育一定时间后，吸附于平皿壁上的细胞即为单核细胞，未吸附的细胞即为淋巴细胞。

一、试剂及配制

1. 含5%小牛血清PRMI-1640培养基。

2. Hank’s液。

二、操作方法

1. 含5%小牛血清PRMI-1640培养基将单个核细胞配成细胞悬液，将细胞悬液置于玻璃或塑料平皿内，37℃静置30～60min 。单核细胞即吸附于平皿表面；

2. 吸取非吸附细胞（淋巴细胞），并用Hank’s液轻轻吹打，再次吸取非吸附细胞；

3. 用尖吸管反复吹打，或用橡皮刮轻轻刮离，使粘附的单核细胞脱落，并收集之；

4. 将淋巴细胞和单核细胞分别配成细胞悬液，4℃保存备用。

三、鉴定

经非特异酯酶染色（单核细胞为阳性）证明其纯度，台盼蓝拒染法计算存活率，其存活率应大于95%。