直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染
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锥虫的感染,本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物,确定最适PCR反应条件,建立kDNA片
段的PER扩增技术,应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的
滤纸
血标本直接PER检测伊氏锥虫。
结果发现,PER扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364 bp。能检测的最小DNA量是O.06 Pg,与布氏锥虫、
活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提,直接PER能检测感染小鼠的早期
滤纸
血样本,敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性,方
法快捷,可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。
关键词伊氏锥虫;直接PCR;动基体DNA(kDNA);血液
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