我设计了几对引物，帮我看看！

tg tctgggtctt gcacaatgac
119521 aatgggtccc tgtttttccc agaggctctt ttgttctgca gggattgaag acactccagt
119581 cccacagtcc ccagctcccc tggggcaggg ttggcagaat ttcgacaaca catttttcca
119641 ccctgactag gatgtgctcc tcatggcagc tgggaaccac tgtccaataa gggcctgggc
119701 ttacacagct gcttctcatt gagttacacc cttaataaaa taatcccatt ttatcctttt
119761 tgtctctctg tcttcctctc tctctgcctt tcctcttctc tctcctcctc tctcatctcc
119821 aggtgcaaat agtctacaaa ccagttgacc tgagcaaggt gacctccaag tgtggctcat
119881 taggcaacat ccatcataaa ccag
目的：克隆这个片断。
结果：
1, 5 TGTCTGGGTCTTGCACAATGACA 3
3 TCCGTTGTAGGTAGTATTTGGTC 5
   rating   L ength  Tm  GC%  oD     Ta opt
sense   88   23  63.5  47.8  32.7  1  
Anti-sense  100   23  60.8  43.5  33.6  1  
product   82   406  88.2  49.0       55.0
HairpinΔG=0.1

2. 5 TGTCTGGGTCTTGCACAATGAC 3
3 TCCGTTGTAGGTAGTATTTGGTC 5
   rating  length  Tm  GC%  oD     Ta opt
sense   88   22   60.6  50  33.4  1  
Anti-sense  100   23   60.8  43.5  33.6  1  
product   86   406   88.2  49.0       54.9
Hairpin ΔG=0.3

3.   5 TGTCTGGGTCTTGCACAAT 3
3 CGTTGTAGGTAGTATTTGGTC 5
   rating  length  Tm  GC%  oD     Ta opt
sense   88   19   53.7  47.4  33.8  1  
Anti-sense  100   21   55.5  42.9  33.1  1  
product   84   40 6   88.2  49.0       52.8
Hairpin ΔG=0.2

4. 5 TGTCTGGGTCTTGCACAATGACA 3
3 CCGTTGTAGGTAGTATTTGGTC 5
   rating  length  Tm  GC%  oD    Ta opt
sense   88   23  63.5  47.8  32.7  1  
Anti-sense  100   22  59.6  45.5  33.4  1  
product   82   406  88.2  49.0       54.6
Hairpin ΔG=-0.1

5 5 TGTCTGGGTCTTGCACAATGAC 3
3 CCGTTGTAGGTAGTATTTGGTC 5

   rating  length  Tm  GC%  oD    Ta opt
sense   88  22  60.6  50  33.4  1  
Anti-sense  100  22  59.6  45.5  33.4  1  
product   84  406  88.2  49.0      54.6
Hairpin ΔG=0.3
后面两对有连续的CC，影响大吗？

ΔG的正负是什么意思？对结果有何影响？