细胞生物基本方法:肌组织细胞培养
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肌组织细胞培养
1 )骨骼肌细胞培养
1. 杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成 0.3 ~ 0.5 厘米小块。
2. 用不含钙镁离子的 Hanks 液配的 0.25 %胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加 10 %小牛血清培养,为促进分化可加 1 %的胎汁。
3. 细胞接种量为 2 × 106 / 皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,常用 Hanks 液配的 0.01 %明胶。
2) 肌细胞培养
1. 选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以维持箱内温度),每日翻动一次( 180 度),孵育 9 ~ 12 天。
2. 取鸡胎法相间《组织培养和分子细胞学技术》 53 页。
3. 用眼科剪剪开胸腔,剥出心脏,置入皿中用 Hanks 液漂洗 1 ~ 2 次。
4. 小心剪除大的动静脉,保留心室肌,用组织块或消化培养法均可。