细胞生物基本方法:神经组织细胞培养
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神经组织细胞培养
1. 获取脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入 Hanks 液中漂洗 1 ~ 2 次后,置于 30 ~ 50 倍的 Hanks 液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。
2. 为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立 5 ~ 10 分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等杂物易漂浮于悬液表层,吸除上清,如此反复二三次可获得较多的细胞成分。
3. 向末次沉淀物中加入适量营养液,通过纱网或纱布滤过,计数细胞并调整好细胞密度,接种入培养瓶或皿中,置 5 % CO2 温箱中培养。
4. 细胞生长汇合后,可用 0.25 %胰蛋白酶消化法做传代处理,加消化液的量以能覆盖细胞层即可,待细胞开始从瓶壁脱离(平均 5 ~ 10 分钟),加入含有血清培养液,吹打制成细胞悬液。