免疫球蛋白提取技术:IgM的分离与提纯
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(一)材料
1. 血清
2.葡聚糖凝胶G200
3.洗脱液0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl或0.1Mol/L pH8.0 Tris-HCl+0.14Mol/L NaCl)。
(二) 操作方法
选取2.50cm×90cm层析柱,用葡聚糖凝胶G200装柱,平衡后,直接加 血清 样品10ml或硫酸铵粗提制品,洗脱液洗脱,流速0.25ml/min,分管收集,测OD 280 值,第一峰即为IgM。将第一峰的数管混合,浓缩、鉴定。
1. 血清
2.葡聚糖凝胶G200
3.洗脱液0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl或0.1Mol/L pH8.0 Tris-HCl+0.14Mol/L NaCl)。
(二) 操作方法
选取2.50cm×90cm层析柱,用葡聚糖凝胶G200装柱,平衡后,直接加 血清 样品10ml或硫酸铵粗提制品,洗脱液洗脱,流速0.25ml/min,分管收集,测OD 280 值,第一峰即为IgM。将第一峰的数管混合,浓缩、鉴定。