培养血管平滑肌细胞得一点体会
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最近第一次养细胞就养成功了,非常高兴,发上来跟大家分享.
养细胞主要是 无菌 ,我用得是组织块消化法,首先要把培养用的DMEM和PBS 用过滤法抽吸式过滤一下,取材时注意无菌,150克的大鼠用7毫升的1%戊巴比妥消毒,用DMEM反复清洗,用眼科剪刮去外膜,剪开血管,用棉签刮去内膜的脂滴,再用眼科剪剪成碎块,铺到培养瓶里,均匀铺开,滴少许含20%FCS的DMEM湿润一下,然后再加3---5毫升的DMEM(含20%FCS)到培养瓶内,使铺组织块的一面向上,放到孵育箱里,约5个小时后 翻正,静置,大约一周就有细胞长出.
祝福大家试验顺利!
