免疫组织化学:几种溶液的配制方法

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1、PBS :

取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。

 

 

2、TBS：

2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）

Tris（三羟甲基氨基甲烷）

60.57g

1N HCL

约420ml

双蒸水

加至1000ml

Tris缓冲液配制方法：

先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6， 最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液，4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方：

Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）

100ml

NaCI

8.5~9g (0.15mol/L)

双蒸水

加至1000ml

TBS配制方法：

先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。

 

 

3、枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）：

3.1 储存液：

A. 0.1 M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。

3.2 工作液：

取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.1

 

 

4、胰酶（Trypsin）：

4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：

常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。