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Miltenyi的柱子回收方法

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准备使用回收的柱子时,抗体孵育始,即将柱子置于新鲜的75%酒精中,柱的容器内盛满酒精,自动流下,既消毒,又de-gas,去除气泡十分关键。洗抗体时,即开始洗柱子,将回收柱架于消毒过的长试管口上。换新的酒精自然滴下,换PBS+0.1%FBS冲洗之,最后用MACS Buffer冲洗。柱子准备完毕,准备上柱的细胞也就同时准备好了。

回收方法

将长试管注满PBS,回抽柱子的活塞,倒出回抽液。倒入新的PBS,打出之;重复两次---此时基本上将柱子内的杂细胞除尽。再抽、打两三次无水酒精或95%酒精,然后置于50-60度烘箱,过夜,即能防止生锈。

此法回收的柱子可用2-5次。

本人用回收的柱子分离血CD4细胞,纯度>90%。

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