【求助】血清MiroRNA提取
丁香园论坛
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各位老师师兄、师姐们!我用的是mirVana? PARIS? Kit 提取血清MicroRNA,提了半个月,OD值总在1.3左右。我是严格按照说明书来的,而且酚氯仿抽提那步,我也很小心确保不会吸到蛋白质。大家帮我分析一下,问题会出在哪里啊?
使用是mirVana? PARIS? Kit 提取血清MicroRNA的260/280就是在1.3到1.4左右,这个不奇怪!
谢谢斑竹!它protocol上说纯化的RNA,OD在1.8-2.1之间,我OD值达不到,可以拿来跑RT-PCR吗?
你可以先跑一次PT-PCR看下效率如何以及熔解曲线的峰是否单一,如果效率接近100%,峰值也单一,那么结果就是可信的,那么就算你提的RNA含有蛋白,蛋白对RT的影响也不大
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