正常动物真皮成纤维细胞的培养

实验材料：

1. 正常动物皮肤

2. 不含Ca²⁺ 和Mg²⁺ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2

3. 细胞培养瓶（T25）

4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊

实验方法：

1. 取正常动物皮肤，置于小培养皿内，用PBS漂洗3-4次，以除去表面血污及毛发；

2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm³ 左右大小，再用PBS漂洗3次;

3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁，用巴氏管分散均匀，加入全培养液，倒置培养瓶，盖好瓶盖置于37℃、5%CO₂ 的培养箱中培养过夜；

4. 轻轻翻转培养瓶，让培养液慢慢浸润组织块，视组织块多少补加培养液。当培养液颜色变黄时，表明培养液pH偏酸，应进行换液；