RT―PCR检测HeLa细胞中β3-actin的表达
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1.0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水
在1 L蒸馏水中加入1 mL DEPC,在磁力搅拌器上搅拌过夜,分装后高压灭菌30 rIlin备用。
2.5 X甲醛凝胶电泳缓冲液
0.1 mol/L MOPS
40 mmol/L NaAC
5 mmol/L EDTA(pH 8.0)
3.10 x RNA加样缓冲液
50%甘油
1 mmol/L EDTA(pH 8.0)
0.25%二甲苯青
0.25%溴酚蓝
4.6×DNA加样缓冲液
40%(质量/体积分数)蔗糖
0.25%二甲苯青 0.25%溴酚蓝
5.5 X第一链反应缓冲液
250 mmol/L Tris―HCl(pH 8.3)
375 mmol/L KCI
15 mmol/L MsCh
6.10×PCR缓冲液
200 rmnol/L riffs―HCI(pH 8.4)
500 mmol/L KCl
7.5×TBE(TIis一硼酸缓冲液)
称取54 g Tris碱,27.5 g硼酸,依次溶解于800 mL蒸馏水中,加入20 mL O.5 mol/LEDTA(pH 8.O)定容至1 L。
8.溴化乙啶(10 ms/mE)
在100 mL蒸馏水中,加人1 g溴化乙啶,在磁力搅拌器上搅拌数小时以确保其完全溶解,于室温避光保存。
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