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RT―PCR检测HeLa细胞中β3-actin的表达

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1.0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水
在1 L蒸馏水中加入1 mL DEPC,在磁力搅拌器上搅拌过夜,分装后高压灭菌30 rIlin备用。

2.5 X甲醛凝胶电泳缓冲液

0.1 mol/L MOPS

40 mmol/L NaAC

5 mmol/L EDTA(pH 8.0)

3.10 x RNA加样缓冲液

50%甘油

1 mmol/L EDTA(pH 8.0)

0.25%二甲苯青

0.25%溴酚蓝

4.6×DNA加样缓冲液

40%(质量/体积分数)蔗糖

0.25%二甲苯青 0.25%溴酚蓝

5.5 X第一链反应缓冲液

250 mmol/L Tris―HCl(pH 8.3)

375 mmol/L KCI

15 mmol/L MsCh

6.10×PCR缓冲液

200 rmnol/L riffs―HCI(pH 8.4)

500 mmol/L KCl

7.5×TBE(TIis一硼酸缓冲液)
称取54 g Tris碱,27.5 g硼酸,依次溶解于800 mL蒸馏水中,加入20 mL O.5 mol/LEDTA(pH 8.O)定容至1 L。

8.溴化乙啶(10 ms/mE)
在100 mL蒸馏水中,加人1 g溴化乙啶,在磁力搅拌器上搅拌数小时以确保其完全溶解,于室温避光保存。

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