互联网2013-11-13
1.于1.5ml离心管中加入5μl H2 O,2μl引物(N6),5μl DNA(0.1μg-1μg)。
2.充分混匀,98°C 3分钟。
3.离心1秒钟,将离心管盖上的汽化水甩下。
4.加入2.5μl dNTPs(各2.5mM),3μl缓冲液,6μl H2 O,1μl Klenow酶。充分混匀,置于冰上,拿到同位素室。
5.加入1μl 32 P-dCTP,37°C 10分钟。
6.加入100μl TE,混匀上到已在大管中加好4μl 6N NaOH的Sepherdex-G50柱,室温下3000rpm离心3分钟。
7.再加入100μlTE。室温下3000rpm离心3分钟。
8.将大管中标好的探针加到杂交管中杂交即可。
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