聚乙烯吡咯酮包被的硅胶混悬液分离法分离外周血单个核细胞
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聚乙烯吡咯酮包被的硅胶混悬液分离法 分离外周血单个核细胞
【试剂及配制】
（1） 1.5mol/L 10×PBS：称取10g NaCl，2.5g KCl，14.4g Na2 HPO4 ，2.5g KH2 PO4 ，
先用少量蒸馏水溶解上述各物，再用蒸馏水定溶至1000ml。
（1） 1×PBS：将上述10×PBS用蒸馏水稀释10倍即成。
（2） 比重为1.077 Percoll悬液
【操作方法】
（1） 取比重1.077的Percoll 3ml,放入15×15mm试管中；
（2） 用PBS将肝素抗凝血稀释1～2倍后，将稀释全血加到Percoll 液上，稀释的血液：Percoll液约为2：1；
（3） 用水平离心机以1500r/min离心10min，离心后单个核细胞位于血浆和Percoll 液的界面层，红细胞和粒细胞沉淀在Percoll层下，一部分单核细胞和血小板位于Percoll层上；
（4） 吸取界面单个核细胞层，用PBS洗三次；
（5） 用适当的培养液重悬单核核细胞，配成所需浓度备用；
（6） 用台盼蓝拒染法检查细胞活力。
