连续稀释分离法

　　①取1克土样，在火焰旁放入装有99毫克无菌水的锥形瓶内，充分摇匀，将菌分散。

 

　　②用移液管吸取上述菌悬液1毫升，放入盛有9毫升无菌水的试管中，并进一步稀释成1000倍，即10 ^-3 的菌悬液。按10倍稀释法连续稀释到10 ^-8 （每1次稀释，都须更换移液管）。

 

　　③取3支1毫升移液管分别从10 ^-8 、10 ^-7 、10 ^-6 菌悬液中吸取1毫升菌悬液，分别注入编号10 ^-8 、10 ^-7 和10 ^-6 的培养皿内，同一稀释液重复做3个培养皿。

 

　　④将温度为45～50℃的营养琼脂培养基倒入上述各培养皿内，轻轻旋转使菌悬液充分混合均匀，凝固后，将培养皿倒扣放置在温暖处（28℃左右），每天观察培养基表面有无微生物菌落。

 

　　⑤经过一定时间培养后，培养基上长出菌落，根据菌落特征，初步判断属于何种类型的微生物，并在显微镜下检查，若菌体形态一致，则可认为是初步分离到纯菌种。

 

　　⑥将分离培养所得的纯菌种，从平板培养基转移到试管斜面培养基上培养。