原理
通过连续稀释法滴定和分离细菌菌落。
材料与仪器
噬菌体
LB
试管 平板
LB
试管 平板
步骤
1. 在3个16~18 mm的无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液。
2. 吸取5 μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。
5. 计算每毫升细菌细胞数
细菌细胞数/ml = 10X菌落数X稀释倍数。
典型的饱和培养液含约109 细胞/ml。噬菌体悬浮液也可以连续稀释；一般存储液含约1011 噬菌体/ml 。
6. 包裹好有单个菌落的平板，保存于4 °C以备进一步实验用。
2. 吸取5 μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。
3. 接着从1号试管吸5 μl稀释液加入2号试管振荡摇匀，再从2号试管吸5 μl稀释液加人3号试管振荡摇匀。
4. 从每个试管中分别取100 μl菌液涂布于LB平皿上，并且做好记号，待平板干后于37°C培养过夜。
5. 计算每毫升细菌细胞数
细菌细胞数/ml = 10X菌落数X稀释倍数。
典型的饱和培养液含约109 细胞/ml。噬菌体悬浮液也可以连续稀释；一般存储液含约1011 噬菌体/ml 。
6. 包裹好有单个菌落的平板，保存于4 °C以备进一步实验用。
来源：丁香实验
