固体培养基上细菌培养实验

1. 用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。 2. 重新消毒接种环或用新的无菌牙签，从第一划线处将样品划线至平板的其余部分，重复划线至少一次。 3. 于37 °C培养直至长出单菌落。 如果要从很多的菌液中分离单克隆，可以将平板分为4、6或8小份，在每小份中划出单克隆。

1. 在3个16~18 mm的无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液。 2. 吸取5μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。 3. 接着从1号试管吸5μl稀释液加入2号试管振荡摇匀，再从2号试管吸5μl稀释液加人3号试管振荡摇匀。 4. 从每个试管中分别取100μl菌液涂布于LB平皿上，并且做好记号，待平板干后于37°C培养过夜。 5. 计算每毫升细菌细胞数

1. 吸取0.05~1 ml培养物至一只干的平板上。 2. 用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀，或用涂布棒的边缘在平板的表面画光栅图案（一系列平行线），然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。 3. 于37 °C培养箱内平板盖微开至平板完全晾干。盖上平板盖，培养直至长出单菌落。

1. 用金属圈将一块无菌的绒布套在影印模具上。无菌的滤纸块或一次性的影印平板均可使用。 2. 标记主平板的方向，然后将该平板向下轻轻地压在绒布上。 3. 按主平板的方向轻轻地将一个新鲜的平板压在有菌落痕迹的绒布上，如有必要重复操作。每一块绒布可以影印10 个平板以上。

一、穿刺保存 1. 在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。 2. 挑取一个单菌落，反复将接种环深刺人琼脂中。 3. 拧松盖子，于37 °C培养（8~12 h ）直到在穿刺孔迹中的细菌生长至可见的雾状。 4. 拧紧盖子于15~22°C存放于暗处。 5. 按以下方法复苏菌株 用一支无菌接种环挑取一些带有细菌的琼脂，