MEM培养基的配制步骤

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MEM 1L 配方

1配置前准备：配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净，并用milli water润洗两次。

2.溶解培养基：取5%终体积的milli water，加入到1L玻璃杯中，将干粉培养基倒入烧杯，水洗包装袋内面两次，倒入培养液中。磁力搅拌助溶。

3.补加试剂：根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。

4.加抗生素：一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml，链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。

5.调pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2.

6.过滤除菌：采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3.

7.加小牛血清：根据培养基配置的量将小牛血清分装，冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%。