原理
配制储存浓缩液并冷冻保存。需要的时候解冻、混合、无菌过滤、保存。
材料与仪器
氨基酸浓缩液 维生素 葡萄糖 微量元素
储存瓶
储存瓶
步骤
1. 将溶液解冻,确保所有溶质均溶解。
2 . 按正确的比例将各成分混合:
(a) 氨基酸浓缩液 100 ml
(b) 酪氨酸和色氨酸 200 ml
(c) 维生素 10 ml
(d) 葡萄糖 100 ml
3. 混合后过滤灭菌。
4. 冷冻保存。
5. 使用时取 41 ml 的浓缩液与 959 ml 的 1X BSS 混合。
6. 调节 pH 至 7. 4。
7. 4°C 保存。
8. 临用培养基之前加人血清或其他的补充剂,比如激素、生长因子、脂类。如果用金属作为微量元素,也最好在使用培养基前再加。因为浓缩液如果含磷酸盐,它们会形成沉淀。
2 . 按正确的比例将各成分混合:
(a) 氨基酸浓缩液 100 ml
(b) 酪氨酸和色氨酸 200 ml
(c) 维生素 10 ml
(d) 葡萄糖 100 ml
3. 混合后过滤灭菌。
4. 冷冻保存。
5. 使用时取 41 ml 的浓缩液与 959 ml 的 1X BSS 混合。
6. 调节 pH 至 7. 4。
7. 4°C 保存。
8. 临用培养基之前加人血清或其他的补充剂,比如激素、生长因子、脂类。如果用金属作为微量元素,也最好在使用培养基前再加。因为浓缩液如果含磷酸盐,它们会形成沉淀。
来源:丁香实验