我的骨髓间充质细胞传代方法

大鼠骨髓经ficoll分层后培养。一周换液2次。三周后，可以传代了。然后大约7天可以传代一次。跟das1977网友的方法稍微有点不同。

1. 弃去旧培养液。

2.预热的PBS液轻缓漂洗细胞两遍，尽量洗去残余血清，弃去PBS

3 加0.25%胰酶,0.05%EDTA于37度条件下消化，约两到三分钟，倒置相差显微镜下观察，细胞缩成圆形漂浮为准。我还用手轻轻击打培养皿的两侧，希望可以加速其消化。实验室里的人都这么干，我就有样学样了。：）

4.直接加含10%的LM-aMEM培养基（或血清)终止消化。

5.我没有吹打细胞这个过程哦。下次试试看。但是结果还是不错的。

6. 离心5分钟（1200转/分钟），去上清。

7.加入PBS液吹打混匀，再离心一遍。

8. 用培养液重悬细胞，按1：2传代。 有一次贪心，按1：4传代，结果细胞数太少了，没有一瓶长好的。5555。下次不能贪心了。

9. 补加培养液。75cm2的，加10-15ml

10.送孵箱培养。