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技术分享 | 终于有人把主流的单抗开发平台总结清楚了

普健生物(武汉)科技有限公司

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距1984年Milstein、Köhler因培养出第一代杂交瘤(hybridoma)被授予诺贝尔生理学奖至今已过去38个春秋,但由他们引领的抗体开发技术革命却从未停滞。借助分子生物学及基因工程技术的快速发展,各种高效抗体开发平台日趋完善。各公司都有不同的抗体开发平台,那么主流的抗体开发平台到底有几个?

本文为大家全面介绍单克隆抗体制备比较成熟的三大技术服务平台:

1.杂交瘤技术平台

2.噬菌体展示抗体库技术平台

3.Single B细胞抗体发现技术平台

本文我们继续对单B细胞抗体开发技术做进一步总结。

抗体发现与筛选—杂交瘤技术平台

杂交瘤技术又称为单克隆抗体技术,是在体细胞融合的技术基础上发展而来的。这项技术将免疫动物的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,即可形成在体外长期存活并分泌免疫蛋白的杂交瘤细胞,通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系,即杂交瘤细胞系,利用杂交瘤细胞大批量地生产单克隆抗体。

杂交瘤技术优势和应用

杂交瘤抗体技术起源于上世纪80年代,技术成熟,广泛应用于单克隆抗体的研制。与传统的动物免疫方法不同,杂交瘤技术可以产生针对特定抗原的高纯单克隆抗体,并可大量生产单克隆抗体。由于其极强的特异性,杂交瘤抗体技术已广泛应用于生物学、药学、医学等领域,具有极其广阔的应用前景。

普健生物杂交瘤抗体技术平台

1.免疫方式:多肽、重组蛋白(五大表达系统)、小分子和DNA免疫等多种方案

2.一站式服务:提供从基因序列到杂交瘤细胞开发及鉴定的整体解决方案

3.高效电融合技术:美国BTX公司ECM 2001电融合仪平台,高效、无毒

4.成功率高:单抗项目10000+,成功率高达95.4%

5.个性化定制:提供IHC/IF/FC等应用级别抗体开发服务

5.完善的抗体质量评价体系:WB/IHC/IF/FC等多种检测方式

6.专业技术团队:十余年抗体研发经验,拥有多项发明专利

7.下游对接服务:杂交瘤细胞测序、抗体人源化、重组抗体表达、噬菌体展示、化学发光应用抗体对筛选及大规模抗体生产等服务

 

抗体发现与筛选—噬菌体展示抗体库技术平台

噬菌体展示抗体技术将基因型和表型统一于一体,将选择能力与扩增能力结合起来,具有强大的筛选能力,能够在体外模拟体内的抗体生成过程,可以不经杂交瘤途径,甚至不经过免疫就可以制备和生产单克隆抗体。

 

噬菌体展示技术优势和应用

噬菌体展示技术不论是作为抗体发现的源头技术,还是作为抗体工程中抗体特性改造中的筛选工具都有现有传统技术无可替代的优势和多方向领域的应用。

相对于传统的鼠免疫杂交瘤技术,噬菌体展示技术不仅提高了制备较大数量抗体的能力,同时可对抗体加以改造以满足诸如亲和力、免疫原性等抗体质量方面的要求,获得高亲和性抗体,其筛选周期短,操作简单,应用范围广,可获得人源化抗体。

 

普健生物噬菌体展示抗体库技术平台

1.丰富的噬菌体抗体技术经验,5年以上噬菌体抗体开发,交付上百个噬菌体展示抗体开发项目

2.具有全人源重组抗体库,库容高达千亿级别(10∧11pfu),两步建库法,保证了文库的多样性,抗体库片段插入正确率高;可以两周拿到全人源重组抗体

3.可以构建多物种(人源、小鼠、兔子、羊驼、鸡、狗、猴等)抗体文库

4.可以构建多种类型(scfv、Fab、VHH 等)的抗体文库

 
 
抗体发现与筛选—单B细胞抗体发现技术平台

单个B细胞技术作为一类快速制备单克隆抗体的技术,是将单细胞分离鉴定技术结合多种PCR技术形成的一种单克隆抗体体外筛选及表达体系。它以单个B细胞为起始点,利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单个B细胞中扩增出抗体基因,进而获得抗原特异性抗体。

 
单B细胞技术开发优势和应用

基于单B细胞分选技术的单克隆抗体开发平台,和传统的单克隆抗体开发平台相比,最突出的优势在于能够从人体内直接筛选获得全人源单克隆抗体;该技术所制备的抗体具有高通量、高效率、高稳定性、高特异性等优点,保留了丰富的基因多样性和轻重链可变区的天然配对。基于单B细胞技术开发单克隆抗体成药性高,并已成功应用于新药的开发中,如新冠病毒中和抗体的筛选。 

 
普健生物单B细胞技术平台

1.抗原多样性:五大抗原制备平台(哺乳动物细胞、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、昆虫细胞)

2.双阳性筛选,直接获得抗体基因序列

3.自有流式高通量筛选平台

4.PTX8高效的兔单抗重组表达平台,以及各类抗体分子转换、表达平台

 

普健生物(AtaGenix)于2012年在武汉成立,作为武汉国家生物产业基地公共服务平台—光谷抗体发现与筛选公共服务平台。普健生物(AtaGenix)专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。经过10年的发展,普健生物已成为一家立足武汉,业务覆盖全国、辐射全球的高新技术服务企业。目前公司拥有4200平米自建实验室(包含800平高标准BSL-2级细胞房),拥有齐全蛋白抗体开发设备500余套,包括高通量蛋白纯化仪、Agilent 流式细胞分析仪,全自动HPLC分析仪,openSPR蛋白、抗体亲和力测定仪,Olympus荧光显微镜, BTX电融合仪,undefined7L微生物发酵罐,中试型高压均质机,全自动管式化学发光仪,以及配套的高速离心机,细胞计数仪及大容量细胞培养摇床。公司先后获得荣誉:3551人才计划、高新技术企业、技术先进型服务企业、光谷瞪羚企业

 

普健生物依托自主研发的高通量活性蛋白表达系统,Single B细胞抗体发现技术平台,噬菌体展示抗体库技术和杂交瘤抗体开发平台,抗体表达、抗体人源化和稳定细胞株构建平台,与各研究机构展开技术服务项目合作,助力IVD检测、疫苗生产、重组抗体开发。

普健生物一站式抗体发现平台,专注于活性蛋白,功能性抗体开发。

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