【交流】如何做出你满意的ELISPOT？
丁香园论坛
1671
关于ELISPOT试剂盒:
用Mabteck公司的ALP标记抗体吧，配合Millipore公司的Multiscreen-IP 96孔板，所有的试剂都可以减半，照样可以出非常好的结果，undefined96孔的试剂盒我一直做undefined96孔，但BCIP/NBT显色液没试过减半，因为它很便宜。记得当年第一次做实验就出了很好的结果，经过不断摸索，做出的蓝紫色斑点确实非常漂亮，几乎没有非特异斑点，嗯，ELISPOT是我最拿手的实验之一。
关于PBMC:
拿到血液标本后，首先我要做的是尽快分离PBMC（一般2h内），国产的分离液里天津灏洋的比较好，然后用冻存液冻存PBMC。PBMC的冻存过程比一般的细胞株要更为严格，最好用冻存器。ELISPOT试验的第一天，在包被抗体的同时，将细胞复苏，完全培养液培养过夜，第二天收集细胞并计数即可。
用Mabteck公司的ALP标记抗体吧，配合Millipore公司的Multiscreen-IP 96孔板，所有的试剂都可以减半，照样可以出非常好的结果，undefined96孔的试剂盒我一直做undefined96孔，但BCIP/NBT显色液没试过减半，因为它很便宜。记得当年第一次做实验就出了很好的结果，经过不断摸索，做出的蓝紫色斑点确实非常漂亮，几乎没有非特异斑点，嗯，ELISPOT是我最拿手的实验之一。
关于PBMC:
拿到血液标本后，首先我要做的是尽快分离PBMC（一般2h内），国产的分离液里天津灏洋的比较好，然后用冻存液冻存PBMC。PBMC的冻存过程比一般的细胞株要更为严格，最好用冻存器。ELISPOT试验的第一天，在包被抗体的同时，将细胞复苏，完全培养液培养过夜，第二天收集细胞并计数即可。
