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凝胶过滤 gel filtration

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具有三维网状结构的凝胶颗粒不能使比其网眼大的分子进入,但可使比其小的分子渗入内部,渗入程度因分子的大小而异。因此,高分子溶液在通过凝胶柱时,一定大的分子便能很迅速地通过而被滤出。而大小在其以下的分子可依次缓慢地滤出。应用这种原理,按照分子的大小将分子分部过滤的技术称为凝胶过滤或凝胶柱层析。此法由J Porath等( 1969)所创造。通常使用的凝胶是葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺,并可选择桥接度适宜的凝胶。凝胶过滤法被广泛地用于生物体高分子的分部、精制、脱盐、缓冲液交换等。此外,可采用已知分子量的标准物质,用来推测未知的高分子的分子量。不过,在凝胶过滤中分配系数不仅与分子量有关,也与分子的形状有关,如果标准的和未知的物质分子形状不同,就会有很大误差。

 

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