正常大兔主动脉平滑肌细胞培养
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实验材料：
1. 正常大兔主动脉
2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2
3. 消化液：0.125%胰蛋白酶，0.1%胶原酶Ⅰ
4. 细胞培养瓶（T25）
5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊
6. 网筛（100目）
7. 离心管（15ml、50ml）
实验方法：
1. 处死大兔，分离出主动脉，放入预冷的含双抗的1×PBS（pH=7.2）反复清洗3次。以洗去表面血丝和粘膜；
2. 将清洗过的大动脉剪成2.5 ~ 3cm的血管段，剥离外膜；
3. 将去外膜的血管段放入培养皿中，纵向剪开管壁，然后使内膜朝上，用小刀片轻轻刮去内膜细胞。加1×PBS洗涤中膜3次，将中膜剪成1mm3的组织块；
4. 将组织块移入50ml离心管中，加入适量0.1%胶原酶Ⅰ溶液，在37℃恒温箱中消化1 ~ 3h，至组织块成絮状为止；
5. 1000r/min，离心5min，去上清。再加入0.125%胰蛋白酶溶液，37℃水浴中搅拌消化5 ~ 10min。用含血清的培养基终止消化，吸管轻轻吹打2-3min，以得到分散的平滑肌细胞；
6. 过100目网筛，收集滤液，1000r/min离心5min，弃上清；
7. 加培养液重悬细胞、调整细胞浓度至1×105 个/ml，接种于培养瓶中，置于37℃、5%CO2 的培养箱中培养；
8. 两天后第一次换液，之后每天换液一次。
