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第一次上手原代细胞的培养,请问大家有什么好建议吗?公司建议我使用专用培养基,专用培养基较为昂贵,但是我看文献也可以用普通培养基,我该如何选择?
loveliufudan
对于原代细胞的培养,使用专用培养基可以提高成功率和细胞健康状况,但是成本较高。如果您的实验室经费允许,建议使用专用培养基。如果经费有限,可以尝试使用普通培养基,但需要根据不同类型的细胞进行优化,例如加入适当的生长因子、细胞因子等。
以下是一些常规的原代细胞培养建议:
收集组织时应当快速,最好在细胞处理前2小时内处理。
组织处理时要注意卫生和无菌操作,以避免细菌和真菌的污染。
细胞培养需要使用预热的培养基和试剂,并在无菌条件下进行。
细胞密度要适当,太稀或太密都不利于细胞的生长和维持。
建议使用低通气的培养箱,避免pH、温度和湿度的波动,确保培养条件的稳定。
定期更换培养基,避免过度或不足的营养成分。
细胞的分离和传代要根据细胞类型和生长状态来确定,以避免细胞损伤和凋亡。
总之,成功的原代细胞培养需要注意细胞来源、培养条件和操作技巧等多个因素,需要有耐心和细心,多加尝试和优化。
毛利小五郎的徒弟
可以用普通培养基加细胞因子,必要时加血清
sswei
方法包括组织块培养法,消化培养法,器官培养法和悬浮细胞培养法。
注意事项:
1、组织块培养法:
(1)刚接种后,组织块粘附不牢固,观察和转移过程中动作要轻,以防引起液体振荡,使组织块漂起
(2)培养初期,要注意观察有无细菌、霉菌污染
(3)原代培养要及时观察,记录
(4)过3-5天,需要换液以除去漂浮组织块和残留的血细胞,保证原代细胞正常生长
2、消化培养法:某些特殊类型细胞如内皮细胞需用特殊的消化手段和步骤进行。
3、器官培养和组织块培养类似;
4、悬浮细胞培养法:注意调整细胞浓度。