酶标抗体的鉴定

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1．酶标抗体的活性鉴定 一般以琼脂扩散和免疫电泳进行鉴定。使酶标抗体和相应的抗原 (抗原浓度为1mg/ml)产生沉淀线,洗涤后于底物溶液中显色,显色后用生理盐水漂洗,沉淀线不褪色,说明酶和抗体都具有活性。良好的酶标结合物琼脂扩散滴度一般应在1：16以上。

2．酶结合物的定量测定 包括酶量、IgG含量、酶与IgG克分子 比值以及结合率的测定。

酶量(µg/ml)=OD403nm×0.42

（1）戊二醛法：IgG(mg/ml)=(OD280nm－OD403nm×0.42)×0.94×0.62

(OD403×0.42为酶在403nm的光密度，抗体与酶－戊二醛结合后OD280nm约增加6%，所以乘以0.94校正。由于兔IgGOD280nm=1.0时为0.62mg，所以又乘以0.62)。

（2）过碘酸钠法：IgG(mg/ml)=(OD280－OD403×0.30)×0.62

(3)克分子比值=(酶ug/m) /40000/