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【求助】关于内切酶的提问

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小弟想用pGL3-vector basic作为载体装载一个启动子片段,该启动子片段需要经PCR克隆,故要设计引物,在引物的5‘端加入内切酶位点。经过查询后发现可以用一下三种内切酶:KpnI,NheI,MluI
查TAKARA的产品目录后发现,这三种酶的反应温度均为37°,但所用缓冲液不同。
提问:有没有适合两种酶(从上述三种同时反应的universal buffer(通用缓冲液)?
查看takara产品目录的双酶切buffer表,可以找到大多数双酶切搭配的最适buffer
查了,没有
只能采用M型缓冲液,KPN能到达60%活性,Nhe能到达100%

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