丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

高质量的内切酶 vs.普通内切酶

互联网

1888

不好的内切酶常常被各种 蛋白酶 、非特异外切酶和核酸外切酶污染。

使用被外切酶污染的内切酶切割DNA,则会在切割底物的同时破坏产物的末端(外切酶偷偷切掉1、2个bp,琼脂糖电泳却看不出来),让后续的连接、克隆和表达出现问题!

而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造,在最大程度上避免了外切酶污染的问题,让你的基因安全可靠!

好的内切酶 不好的内切酶
· 活性高
· 品质稳定,保存期长
· 无其它 核酸酶 污染(包括外切酶污染)
·活性不高
·保存一段时间后活性迅速下降
·有其它 核酸酶 的污染(包括外切酶污染)

质粒DNA
 酶切反应 

好的内切酶切割

   不好的内切酶切割

 
完整的DNA片段

       连接
   完整的DNA片段

           少量的外切酶损坏DNA末端
  

           不完整的DNA片段+1、2个dNTP
      
连接

 
成功连接,克隆并表达 连接失败,克隆不成功,无法表达或产物不正确
NEB EcoRV: Survival rate=49/50 Company T EcoRV: Survival rate=3/50

看看,不同质量的内切酶,实验结果大不相同!

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序