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染色体G带技术

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2745

实验八 染色体G带技术
 

【实验目的】
  学习和掌握胰 蛋白酶 法的染色体 G 带显带技术。
【实验原理】
染色体由 DNA 、组蛋白、非组蛋白等组成。在 DNA 链上有 A-T 丰富区及 G-C 丰富区,用 Giemsa 染色 时, A-T 区较 G-C 区更易染色。当用 Tryposin 法处理后,染色体上特定的蛋白质组成部分被抽取,使 得染色体结构变得不均匀,加强 A-T 区与 G-C 区染色上的反差,形成深浅、明暗不同的带。由此,为 染色体识别,染色体遗传病诊断,杂种细胞鉴定,特殊细胞株标记等开创了一系列检测方法。
【实验步骤】
  1、将片置于 37 ℃的 pH 7.0 ICN 0.25 % trypsin 液中 40 ~ 100 sec
  2、pH7.0GKN15sec
  3、吸去下端多余液体
  4、pH 6.8 PBS 5 % Giemsa 染色 10 - 20min
  5、微流水漂洗
  6、吸去下端水分
  7、空气干燥
  8、100 搜索细胞
  9、400x 尋找中期分裂相及染色体分散好的图象
  10、绘图或拍摄
【相关图片】
作业
  1. 简要说明 G 带技术的主要原理。
  2. 在染色体 G 带技术的显带过程中,哪 个步骤最关键,分析用 Trypsin 处理 时间不同的结果并附绘图。
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