酵母基因组DNA简易高效提取方案

1. 10ml菌液过夜培养至饱和（OD600值为2-3）
2. 离心沉降细胞（Sorvall中以2000rpm的速度），然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤
3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮，然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1：1苯酚：氯仿混和液
4. 漩涡摇匀1-2min
5. 加入200μl的 TE缓冲液，倒置混合6-10次。注意：从这步开始漩涡摇匀可能会剪切DNA
6. 在微型离心机中以13000rpm的速度离心样品5min
7. 将上层的水相转移到干净的微量离心管中
8. 加入1体积（400μl）氯虏⒎��旌�ix by inversion
9. 同第6步离心
10. 将上层的水相转移到新的微量离心管中
11. 加1ml乙醇，翻转混匀
12. 在微型离心机中以13000rpm的速度离心2min
13. 弃上清液，用1ml的70%乙醇洗涤沉淀
14. 完全弃去上清液，并将沉淀在室温下干燥。在干燥过程中沉淀颜色会发白但无酒精味
15. 在 400μl 含有最后浓度为2μg/ml的 核糖核酸酶的TE 缓冲液中重悬浮沉淀 16. 37℃培养10min
17. 重复9-12步
18. 在 50μl TE中重悬浮沉淀
裂解缓冲液： 2%（v/v）Triton X-100， 1%（v/v）SDS， 100mM NaCl， 10mM Tris 碱(pH8.0)， 1mM EDTA(pH8.0)
TE缓冲液： 10mM Tris碱（pH8.0）， 1mM EDTA（pH8.0）
YPD： 1%酵母浸膏， 2%细菌用蛋白胨，2%葡萄糖， 20min/升 高压灭菌
酸洗玻璃珠： 425-600μm，Sigma公司，G8772，使用前高压灭菌