M13噬菌体单链DNA提取

我根据分子克隆上的经典方法提取M13噬菌体单链DNA，第一次就成功。但是随后几次，试剂和方法都一样，在可以看见噬菌体白色沉淀的基础上（量足够多），却怎么也提不出来，最后乙醇沉淀时，一片空白。请求各位大侠指点迷津。谢谢 !

 既然首先可以成功，说明方法肯定没问题。建议： 
      1、检查你的试剂有无污染； 
      2、操作有无问题（虽然可能性小，但有时很难想到的）；
      3、也可以换用其他方法，做个对照。

推荐一个快速的用NaI法噬菌体DNA提取的方法，是NEB公司噬菌体展示试剂盒说明书中列的PROTOCOL，我试过，效果还不错。

       取500ul含有噬菌体的上清液
                         ↓
      加入200ul PEG/NaCl，充分混合，室温静置10min 
                         ↓
      4℃ 10000rpm离心10min，去上清
                         ↓
      重新离心，尽量吸去剩余的上清液
                         ↓
      加入100 ul Iodide Buffer彻底溶解沉淀，再加入250ul乙醇，室温孵育10min，大部分噬菌体蛋白存在于溶液中，沉淀单链噬菌体DNA 
                         ↓
      4℃ 10000rpm离心10min，去上清，加入70％乙醇洗沉淀，真空干燥
                         ↓
      加入30 ul TE Buffer溶解沉淀，即为噬菌体DNA溶液 

Iodide Buffer: 
      Tris-HCl(pH8.0) 10mM
      EDTA 1mM
      NaI 4M
      室温避光保存。