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基础实验研究

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1880

基础实验研究

幽门螺杆菌尿素酶抗原的分离纯化及应用

  幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)为人类慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子,人血清中特异性抗HpIgG抗体水平能很好地反映Hp的感染情况,血清学诊断方法已引人们的高度重视,由于Hp全菌抗原与空肠弯曲菌等存在交叉反应,有必要对Hp特异性抗原进行纯化后使用,大量研究表明Hp尿素酶为一种理想的Hp特异性抗原成分。

  我们在国内外首次应用Sephadex G200柱从Hp超声波破碎物离心上清中,一次性提纯了Hp尿素酶抗原,SDS―PAGE分析结果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66000及30000两种蛋白成分,与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相同,提取物中几乎不含有其它杂蛋白成分。经Western blot分析证明所提纯的Hp尿素酶抗原仍具有良好的抗原性。与国外报道中使用的Sephacryl S400、Bio-geP100、Superose 12HR10/30柱提取Hp尿素酶以及正辛基葡萄糖粗提后,用agaroseA-5m柱提纯Hp菌的HM-CAP(内含Hp尿素酶)相比,简化了分离程序,隆低了成本,同时提高了分离纯度和回收率,我们认为Sephadex G200是用于尿素酶抗原提纯化方法的改进。上述Hp尿素酶抗原用ELISA法进行测定,经临床验证,有很高的敏感性、特异性和实用价值,这将有利于推动Hp血清学检查方法的普及应用。

 

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