基础实验研究

基础实验研究

幽门螺杆菌尿素酶抗原的分离纯化及应用

　　幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）为人类慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子，人血清中特异性抗HpIgG抗体水平能很好地反映Hp的感染情况，血清学诊断方法已引人们的高度重视，由于Hp全菌抗原与空肠弯曲菌等存在交叉反应，有必要对Hp特异性抗原进行纯化后使用，大量研究表明Hp尿素酶为一种理想的Hp特异性抗原成分。

　　我们在国内外首次应用Sephadex G200柱从Hp超声波破碎物离心上清中，一次性提纯了Hp尿素酶抗原，SDS―PAGE分析结果表明，所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66000及30000两种蛋白成分，与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相同，提取物中几乎不含有其它杂蛋白成分。经Western blot分析证明所提纯的Hp尿素酶抗原仍具有良好的抗原性。与国外报道中使用的Sephacryl S400、Bio－geP100、Superose 12HR10/30柱提取Hp尿素酶以及正辛基葡萄糖粗提后，用agaroseA－5m柱提纯Hp菌的HM－CAP（内含Hp尿素酶）相比，简化了分离程序，隆低了成本，同时提高了分离纯度和回收率，我们认为Sephadex G200是用于尿素酶抗原提纯化方法的改进。上述Hp尿素酶抗原用ELISA法进行测定，经临床验证，有很高的敏感性、特异性和实用价值，这将有利于推动Hp血清学检查方法的普及应用。