荧光fluorescence

互联网2013-11-14

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荧光 fluorescence 用光照射某些化合物时，根据夫兰克 -康登（ Fr－ ank－ Condon）原理，原子间距离不发生变化，而引起电子向激发态跃迁（图中向上的箭头）。这种情况，多半是向振动能级高的地方跃迁。激发态寿命短的，振动能就逸散，仍旧回到基态，但寿命长的，振动能可传给周围介质而跃迁到较低的振动能级，此后再返回基态，后一个能量是以发光的形式放出（图中向下的箭头）。因此，发光带的波长是出现在比吸收带波长更长的一边。这个现象就是荧光。这样，由于荧光和吸收光的波长不同，所以检出灵敏度非常高，应用范围也广。例如：把某物质用荧光化合物标记，可作为示踪物使用；再有当某些化合物和蛋白质等的疏水区结合的时候，就开始发出荧光，因此可用于疏水区的检出与鉴定。另外，假如从吸收光到发光的时间（寿命）十分长，那么在此期间像蛋白质这样的高分子也要进行旋转扩散。因此，用偏光作为激发光，只要测定荧光的偏振面发生了多大的旋转，就能推断出高分子的大小。