平板凝集反应

材料与试剂

以布氏杆菌病平板凝集反应为例。

<font>1</font> ．玻璃板、刻度吸管等。

<font>2</font> ．布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清。

操作方法

<font>1</font> ．取洁净玻板一块，用玻璃铅笔划成方格，并注明待检血清号码。

<font>2</font> ．取０ <font>.</font> ２ <font>ml</font> 吸管分别吸取 <font>0.08ml</font> 、 <font>0.04ml</font> 、 <font>0.02ml</font> 和 <font>0.01ml</font> 各放入一方格内。大规模检验时，可只做２个血清量，大动物用 <font>0.04ml</font> 和 <font>0.02ml</font> ，中小动物用 <font>0.08ml</font> 和 <font>0.04ml</font> 。每检一个样品需换一只吸管。

<font>3</font> ．每格内加布氏杆菌平板凝集抗原 <font>0.03ml</font> ，滴在血清附近，而不要与血清接触。用牙签（或火柴杆）自血清量最小的一格起，将血清与抗原混匀，每份血清用一根牙签。

<font>4</font> ．混合完毕，将玻板置凝集反应箱上均匀加温或采用别的办法适当加温，使温度达到３<chmetcnv>０℃</chmetcnv> 左右。 <font>3min</font> ～ <font>5min</font> 内记录结果。

结果判定

＋＋＋＋：出现大的凝集块，液体完全清亮透明，即 <font>100</font> ％凝集。

＋＋＋　：有明显的凝集片，液体几乎完全透明，即 <font>75</font> ％凝集。

＋＋　　：有可见的凝集片，液体不甚透明，即 <font>50</font> ％凝集。

＋　　　：液体混浊，有小的颗粒状物，即 <font>25</font> ％的凝集。

－　　　：液体均匀混浊，即不凝集。

以出现＋＋凝集的血清最高稀释倍数作为该份血清的凝集价。大动物（牛、马、骆驼等）以 <font>0.02ml</font> 出现凝集价判为布氏杆菌病血清阳性， <font>0.04ml</font> 出现凝集价判为可疑。中小动物（猪、山羊、绵羊等）以 <font>0.04ml</font> 出现凝集价判为该份血清为布氏杆菌病阳性血清， <font>0.08ml</font> 出现凝集价判为可疑。

注意事项

<font>1</font> ．每次试验必须以标准阳性血清和标准阴性血清进行对照。

<font>2</font> ．加抗原前必须摇匀。

<font>3</font> ．反应温度最好保证在 <chmetcnv><span><font>30</font> </span> <span>℃</span> </chmetcnv> 左右， <font>3min</font> ～ <font>5min</font> 内判定。如反应温度偏低，可适当延

长判读时间。

<font>4</font> ．如用两个血清量作试验，任何一个血清量出现凝集反应时，则需要用四个血清量重检。

<font>5</font> ．平板凝集反应最好是用于初筛，如出现阳性或可疑反应，再用试管凝集反应进行复检，以定性。

<font>6</font> ．平板凝集反应与试管凝集反应的关系。

<font><span>表 平板凝集反应与试管凝集反应的关系</span> </font> <font> </font>