反向间接乳胶凝集反应

原理

同炭凝，只是载体换为聚苯乙烯乳胶，它是一种由 <font>0.6μm</font> ～ <font>0.7μm</font> 的颗粒所组成的胶体溶液，具有良好的吸附蛋白质的性能。

间接乳胶凝集目前已用于鼠疫菌、沙门氏菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌、葡萄球菌肠毒素等的诊断。

材料与试剂

<font>1</font> ．聚苯乙烯乳胶

<font>2</font> ．免疫血清

<font>3</font> ．正常血清

<font>4</font> ．标准抗原

<font>5</font> ．待检抗原

<font>6</font> ． <font>0.02Mol/L pH8.2</font> 硼酸缓冲液

硼砂 <font><span> </span> <chmetcnv>6.67g</chmetcnv> </font>

硼酸 <font><span> </span> <span> </span> <chmetcnv>8.04g</chmetcnv> </font>

<font>H₂ O<span> </span> </font> 加至 <font><span> </span> 1 000ml</font>

<font>7</font> ．生理盐水

操作方法

<font>1</font> ．乳胶液制备 <font> </font> 取聚苯乙烯乳胶 <font>0.10ml</font> ，加灭菌蒸馏水 <font>0.40ml</font> ，再加 <font>pH8.2</font> 硼酸缓冲液 <font>2ml</font> ，混合后即为 <font>25</font> 倍稀释的乳胶液。

<font>2</font> ．乳胶致敏 <font> </font> 在上述乳胶液中滴加稀释的免疫血清 <font>0.20ml</font> ～ <font>0.70ml</font> ，边加边摇，当出现肉眼可见的颗粒后，仍继续加血清，直至颗粒消失，成为均匀的乳胶悬液为止。镜下检查应无自凝。使用时，应与一定稀释度的相应抗原出现阳性反应，与生理盐水出现阴性反应为合格。加防腐剂后，于冰箱内保存。注意防止冰冻。

同时以正常血清代替免疫血清进行乳胶致敏，以作对照。

<font>3</font> ．取洁净玻板一块，用玻璃铅笔划成小格，滴加待检样品 <font>0.10ml</font> ，再滴加高免血清致敏乳胶 <font>0.01ml</font> ，以牙签或火柴杆混匀，在 <font>3min</font> 内判定结果。

结果判定

“＋＋＋＋”：全部乳胶凝集，成絮状团块，液体清亮。

“＋＋＋” <font> </font> ： <font> </font> 大部分乳胶凝集成较小的颗粒，液体清亮。

“＋＋” <font> </font> ： <font> </font> 半量乳胶凝集成细小颗粒，液体混浊。

“＋” <font> </font> ： <font> </font> 较少量的乳胶凝集成可见的细颗粒，液体混浊。

“－” <font> </font> ： <font> </font> 全部乳胶仍为均匀液体，无颗粒。

以“＋＋”作为该反应滴度的终点。