反向间接乳胶凝集反应

原理

 

同炭凝，只是载体换为聚苯乙烯乳胶，它是一种由 0.6μm ～ 0.7μm 的颗粒所组成的胶体溶液，具有良好的吸附蛋白质的性能。

间接乳胶凝集目前已用于鼠疫菌、沙门氏菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌、葡萄球菌肠毒素等的诊断。

 

 

 

材料与试剂

 

1 ．聚苯乙烯乳胶

2 ．免疫血清

3 ．正常血清

4 ．标准抗原

5 ．待检抗原

6 ． 0.02Mol/L pH8.2 硼酸缓冲液

硼砂 6.67g

硼酸 8.04g

H₂ O 加至 1 000ml

7 ．生理盐水

 

 

 

操作方法

1 ．乳胶液制备 取聚苯乙烯乳胶 0.10ml ，加灭菌蒸馏水 0.40ml ，再加 pH8.2 硼酸缓冲液 2ml ，混合后即为 25 倍稀释的乳胶液。

2 ．乳胶致敏 在上述乳胶液中滴加稀释的免疫血清 0.20ml ～ 0.70ml ，边加边摇，当出现肉眼可见的颗粒后，仍继续加血清，直至颗粒消失，成为均匀的乳胶悬液为止。镜下检查应无自凝。使用时，应与一定稀释度的相应抗原出现阳性反应，与生理盐水出现阴性反应为合格。加防腐剂后，于冰箱内保存。注意防止冰冻。

同时以正常血清代替免疫血清进行乳胶致敏，以作对照。

3 ．取洁净玻板一块，用玻璃铅笔划成小格，滴加待检样品 0.10ml ，再滴加高免血清致敏乳胶 0.01ml ，以牙签或火柴杆混匀，在 3min 内判定结果。

 

 

 

结果判定

 

“＋＋＋＋”：全部乳胶凝集，成絮状团块，液体清亮。

“＋＋＋” ： 大部分乳胶凝集成较小的颗粒，液体清亮。

“＋＋” ： 半量乳胶凝集成细小颗粒，液体混浊。

“＋” ： 较少量的乳胶凝集成可见的细颗粒，液体混浊。

“－” ： 全部乳胶仍为均匀液体，无颗粒。

以“＋＋”作为该反应滴度的终点。