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免疫中和反应技术(Neutralization test technique):简单定性中和试验

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病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于: 从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病; 用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型; 测定抗病毒血清或抗毒素效价; 新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行,亦可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。

本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约 <font>100 LD<sub>50</sub> </font> <font>1 000LD<sub>50</sub> </font> <font>TCID<sub>50</sub> </font> )。污染的病料需加抗生素(青霉素、链霉素各 <font>200</font> <font>1 000</font> 单位),或用细菌滤器过滤,与已知的抗血清(适当稀释或不稀释)等量混合,并用正常血清加稀释病料作对照。混合后置 <chmetcnv><span><font>37</font> </span> <span>℃</span> </chmetcnv> <font>1h</font> ,分别接种实验动物,每组至少 <font>3</font> 只。分别隔离饲喂,观察发病和死亡情况。对照动物死亡,而中和组动物不死,即证实该病料中含有与该抗血清相应的病毒。本法亦可用于毒素(如肉毒毒素)的鉴定和分型。

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